高效液相色谱图出现异常处理方法

  

　　高效液相色谱中遇到的问题会让人感到烦躁。你正在进行一些分析操作，在你弄清楚你的仪器为什么不起作用之前，你没有办法再继续进行你的分析。高效液相色谱柱的一些常见问题时有出现。知道这些是什么以及如何解决它,请继续阅读找出其中的一些问题以及如何解决它们。如果没有你想要的答案请联系我们，我们乐意为你效劳。


　　1.没有峰值

　　可能有多种因素导致您的高效液相色谱输出中没有峰或峰很小。正常读数应该有大而薄的峰，峰的高度可能略有不同。小峰值或没有峰值可能意味着您的检测器灯关闭、没有流动相流动、样品丢失或变质，或者您的检测器、积分器、进样阀或记录仪有问题。

　　确保您的检测器首先打开，然后检查所有电气连接和电缆。确保自动进样器小瓶中有足够的液体，并且样品中没有气泡，然后用新的标准溶液重新检查系统。如果这不起作用，请检查衰减或增益设置状态，并在必要时自动归零。


　　2.没有流量

　　如果您的输出完全没有峰，则高效液相色谱柱中可能没有流动。这可能意味着您的泵已关闭，或者流量以某种方式中断或阻塞。泵头中也可能有泄漏或空气。

　　如果泵已关闭，则启动泵并检查储罐中的流动相液位和整个系统的流量。检查样品回路是否有任何障碍物或气锁，并确保流动相成分可混溶，且流动相已正确脱气。

　　从那里继续检查系统安装是否松动，泵是否有泄漏或其他问题。断开保护柱上的管道(如果有)并检查流量。如果仍有问题，请以高流速清洗泵和灌注系统，并松开系统可能有的所有止回阀。如果所有其他方法都失败，请用100%甲醇或异丙醇冲洗系统。


　　3.压力问题

　　如果你的压力比平时低或者你没有压力，你的系统可能有泄漏或空气停滞。您也可能有一个故障止回阀，或流动相流动受阻或中断。如果您的系统压力过高，泵、注射器、在线过滤器或管道可能有问题，或者您的保护柱或分析柱可能堵塞。

　　对于低压，首先检查整个系统是否有泄漏、接头松动、泵密封故障或阀门损坏。如果一切正常，运行我们之前讨论的相同流动相检查，并检查分析柱和保护柱的流量。如果这不起作用，重新连接所有设备，并尝试以两倍的流量泵送溶剂。

　　对于高压，首先从系统中移除保护柱和分析柱，并用双通阀替换它们，以将注射器重新连接到检测器。以2-5 mL/min的速度运行泵，并尝试隔离原因，从检测器开始，然后是在线过滤器，然后返回泵。如果问题似乎出在分析柱上，当分析柱与检测器断开连接时，反转并冲洗分析柱，必要时更换入口筛板或分析柱。


      4.分裂峰

　　如果你开始看到峰在中间向下倾斜，形成一个M形，那么在你的保护柱或分析柱的入口处可能会有一些污染。你也可能有部分堵塞的筛板或不均匀的缝隙在塔的入口。您的样品溶剂也可能与流动相不相容。

　　如果您认为入口被污染，反转并冲洗色谱柱，必要时更换筛板。也可以在色谱柱顶部重新填充具有相同键合相功能的薄膜颗粒，然后继续反向使用色谱柱。

　　如果您认为问题出在样品上，请在流动相中调整样品。样品和流动相之间的酸碱度差异导致峰分裂。


        5.拖尾和前沿峰

　　你可能会注意到，你的顶峰不是直线上升和下降，而是在前面或后面开始轻微倾斜，这被称为向前或向后移动。这通常意味着您的保护柱或分析柱可能磨损或色谱柱可能过载。拖尾可能由样品中污染或变质的流动相或干扰流动组分引起，而推进可能由样品中的溶剂问题引起。

　　如果有拖尾峰，首先取下保护柱，试着分析，必要时更换。您可能还需要恢复或替换分析列。一定要检查流动相的组成和色谱柱的性能。

　　如果您有一个前峰，请尝试注入更小的体积或稀释样品。如果您的溶剂有问题，请调整溶剂，在开始分析之前，用50柱体积的高效液相色谱级乙酸乙酯以标准流速的2或3倍冲洗极性键合相柱，然后用中等极性溶剂冲洗。您可能还想尝试其他列类型。


　　6.负峰

　　如果你看到负峰开始出现，可能是你的记录仪的导线接反了。溶质的折射率可能低于流动相的折射率，或者样品溶剂和流动相的组成有很大的不同。您的流动相也可能更能吸收样品成分吸收的紫外线波长。

　　检查记录仪电线的极性，确保它们没有反转，然后尝试反转电线或使用折射率较低的流动相。您可以调整或更换样品溶剂，最好尽可能在流动相中稀释样品。如果问题出在紫外波长，请在使用间接紫外检测时改变极性，或者使用吸收所选波长的流动相。


　　了解如何解决高效液相色谱柱的问题

　　解决高效液相色谱柱的问题可能会令人沮丧，但请记住，这就像您必须解决的任何其他问题一样。批判性地思考问题的可能原因，开始消除可能性，并遵循这里建议的解决方案。您将立即恢复并运行高效液相色谱柱。